一、细胞基本属性
细胞名称：SK - MEL - 2+LUC人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记
细胞别称：SK - MEL - 2 - LUC；荧光素酶标记黑色素瘤细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
组织来源：皮肤恶性黑色素瘤组织
生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触及基质黏附）
细胞形态：不规则多角形或梭形，融合后呈层状排列
荧光标记：稳定表达荧光素酶基因（Luciferase），需定期添加筛选剂维持表达
细胞代数：P5 - P15（建议使用前验证荧光素酶活性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
培养基：RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗+200μg/mL嘌呤霉素
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约24 - 48小时（需定期检测荧光素酶信号稳定性）
供应限制：仅限体外研究，禁止用于活体实验或临床治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
培养瓶：酒精消毒表面后直接置于培养箱平衡
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（高密度易触发分化）
传代比例：1:3至1:6（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25% Trypsin - EDTA（含1mM EDTA）
37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
消化后需完全中和胰酶（残留酶影响荧光素酶活性）
传代后48小时内避免药物处理，确保荧光素酶表达稳定
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤：
消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
程序降温：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证：
复苏后48小时检测荧光素酶活性（IVIS成像或化学发光法）
功能验证：细胞迁移实验（划痕法需保持荧光素酶信号稳定）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输期间温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 荧光素酶活性缺失（需提供原始检测数据）
4. STR图谱与ATCC参考数据不一致
不予重发情形：
1. 未按规范添加嘌呤霉素导致标记丢失
2. 使用非推荐诱导剂（如强力霉素）干扰荧光素酶表达
3. 长时间暴露于荧光素酶底物导致细胞毒性
4. 未定期检测传代后荧光素酶信号衰减
