一、细胞基本属性
细胞名称
人神经上皮瘤细胞(Human Neuroepithelioma Cells)
细胞别称
SK - N - MC;神经外胚层肿瘤细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
神经外胚层肿瘤组织
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
细胞形态
不规则多角形或纺锤形,核质比高,可形成松散贴壁层
细胞代数
P3 - P10(建议使用前5代进行功能性实验)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(依赖血清批次与培养密度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
避免反复离心导致细胞聚团
建议传代后6小时补加新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清)
细胞密度
冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30min→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证
复苏后48小时检测贴壁率(正常应≥85%)
功能性验证:NSE染色阳性率需>90%
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常(需提供温度追踪数据)
2. 7天内证实支原体污染(需提供荧光PCR结果)
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形
1. 未按说明书进行预包被培养器皿
2. 使用非推荐浓度血清导致分化异常
3. 未定期进行支原体预防性处理
4. 实验操作污染导致细胞状态受损