一、细胞基本属性
细胞名称:U266人骨髓瘤细胞
细胞别称:U266B1细胞;B淋巴细胞瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:53岁男性(原代细胞供体临床诊断为多发性骨髓瘤)
组织来源:骨髓(B淋巴细胞恶性转化)
生长特性:悬浮生长(可形成疏松细胞团)
细胞形态:圆形或椭圆形,胞体透亮,悬浮状态下易聚集成团
细胞代数:P3 - P8(建议使用前3代以确保功能稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI 1640(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO + 90%胎牛血清),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(与培养基更新频率相关)
供应限制:仅限肿瘤机制研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去除冻存液,加入预热培养基重悬
- 培养瓶:直接置于培养箱静置30分钟后轻摇混匀
传代标准:细胞密度达0.8×10⁶ - 1×10⁶ cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度2×10⁵ cells/mL)
操作方法:
- 无需消化,直接离心(1000rpm,5分钟)收集细胞
- 弃旧培养基后用新鲜培养基重悬分瓶
注意事项:
- 维持培养基pH稳定(悬浮细胞对酸性环境敏感)
- 每日观察细胞团块分散情况,避免过度聚集
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:完全培养基 + 10% DMSO(现用现配)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集高活力细胞(存活率≥95%)
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证:CD138表面标志物流式检测(阳性率应>98%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度曲线)
2. 到货7天内证实支原体污染(需第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR分型与数据库不匹配(提供原始数据)
不予重发情形:
1. 未按推荐密度进行传代导致细胞老化
2. 使用非标准培养基(如添加未知成分)
3. 未定期检测支原体造成交叉污染
4. 液氮保存设备故障导致的细胞失活
(注:本产品需在生物安全二级实验室操作,建议佩戴防飞溅护目镜处理悬浮细胞)