一、细胞基本属性
- 细胞名称：WRL68人正常肝细胞
- 细胞别称：WRL68细胞；人肝细胞系；正常肝上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：正常肝组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质支持）
- 细胞形态：单层铺展，呈多角形或铺路石样排列，接触抑制后形态均一
- 细胞代数：P3 - P10（确保功能稳定性与遗传背景一致性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用肝细胞培养基（含5% FBS及肝细胞生长必需因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（依赖培养密度及营养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基离心后重悬
- 培养瓶：酒精擦拭表面，静置于培养箱中平衡1 - 2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（常规每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜完整性受损）
- 传代后12 - 24小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代保护剂）
- 细胞密度：推荐冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 12小时→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）
- 功能验证：白蛋白分泌检测（P5代细胞分泌量应符合标准范围）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
- 收到细胞3天内确认细菌或支原体污染（需提交第三方检测报告）
- 复苏后细胞存活率低于90%（基于台盼蓝染色结果）
- STR基因分型与数据库记录不符
- 不予重发情形：
- 客户未按规范在72小时内复苏细胞
- 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞状态异常
- 自行反复冻融造成细胞损伤
- 未进行污染检测直接开展实验导致结果偏差
