一、细胞基本属性
本产品为人源肺微血管内皮细胞(Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells),又称HPMEC、肺微血管内皮细胞或肺动脉内皮细胞,来源于健康成人肺组织微血管段(供体经严格筛选无肺部疾病史)。该细胞为贴壁生长型,需依赖特定细胞外基质成分,在体外培养中呈现典型“鹅卵石样”单层形态,接触抑制后细胞间紧密连接形成多角形结构。推荐使用P3 - P8代细胞以确保功能稳定性与遗传一致性,细胞规格为1×10^5细胞/T25培养瓶或含无血清冻存液的1mL冻存管。培养体系采用Endothelial Cell Medium培养基(含2%胎牛血清及专用内皮细胞生长因子添加剂),需在37℃、5% CO₂及95%湿度条件下培养。建议使用梯度降温法进行长期冻存(-150℃以下),冻存液含10% DMSO及细胞保护成分,常规倍增时间为48 - 72小时。本产品仅限科研用途,禁止用于临床诊疗或动物实验。
二、细胞培养操作指南
细胞复苏建议采用37℃水浴快速解冻法,冻存管解冻后需立即加入4mL预热的培养基混匀。收到培养瓶时需用75%酒精消毒表面,静置培养箱平衡2小时再开始操作。传代标准为细胞融合度达到85% - 90%(通常间隔3 - 4天),推荐按1:2至1:3比例分瓶,接种密度保持5×10³ cells/cm²。消化程序需使用0.05%无钙镁Trypsin - EDTA溶液,37℃消化1 - 2分钟后立即终止,操作全程需在显微镜下监控细胞形态变化。特别注意避免过度消化损伤细胞连接蛋白,传代后24小时应及时更换培养基以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
冻存前需配制含10% DMSO的无血清冻存液,细胞密度调整至1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。冻存程序需严格执行梯度降温:4℃平衡30分钟,- 20℃预冻2小时,- 80℃过渡过夜后最终转入液氮长期保存。复苏验证包含两个关键指标:24小时内台盼蓝染色法检测存活率需≥95%,P5代细胞需通过Transwell通透性实验验证基础屏障功能完整性。
四、售后服务承诺
若发生以下情形可申请免费重发:经照片证实运输过程温度失控导致细胞死亡;收货3天内PCR检测确认支原体/细菌污染;台盼蓝检测活力低于90%;STR鉴定与产品描述不符。但以下操作失误导致的问题不予重发:延迟复苏超过72小时;使用非指定培养基;反复冻融损伤细胞;未按规范进行支原体检测直接开展实验。建议严格按照操作手册执行实验流程,以保障最佳研究结果。