一、细胞基本属性
- 细胞名称:人乳腺癌细胞(Human Breast Cancer Cell Line)
- 细胞别称:HCC1187;乳腺导管癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:乳腺导管癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需依赖适宜基质)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁,呈不规则多边形
- 细胞代数:P3 - P15(建议使用早期代数以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度及营养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使脱落,立即加入完全培养基终止
- 注意事项:
- 避免过度消化(防止细胞膜损伤)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶-1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P5代细胞应保持稳定增殖曲线)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 3日内确认支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色影像)
- STR谱系与数据库记录不符
- 不予重发情形:
- 解冻后超过48小时未进行贴壁培养
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
- 未按规范进行传代导致细胞老化
- 实验污染后未及时反馈并继续操作