一、细胞基本属性
细胞名称:HCC-1359细胞(人非小细胞肺癌细胞)
细胞别称:HCC1359;肺腺癌细胞;NSCLC细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(供体信息经STR鉴定确认)
组织来源:肺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(多层增殖,无接触抑制)
细胞形态:上皮样,呈多角形或梭形排列
细胞代数:P5 - P20(推荐使用代数以确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS及1%青霉素 - 链霉素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度及传代条件)
供应限制:仅限科研用途,禁止用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:5(依据细胞增殖速率调整)
消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA,37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:避免过度消化导致细胞膜损伤,传代后24小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管;梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法确认);功能验证:CCK - 8增殖实验检测细胞活性(P5代细胞应维持典型增殖曲线)
四、售后服务承诺
重发标准:1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供干冰残留证据);2. 到货3日内检测出支原体污染(附第三方检测报告);3. 复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色图像);4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:1. 细胞解冻后超过72小时未接种;2. 使用非推荐培养基或血清导致功能异常;3. 反复冻融或不当操作引发细胞损伤;4. 未按要求进行支原体筛查直接用于实验