一、细胞基本属性
细胞名称:人结直肠腺癌细胞(Human Colorectal Adenocarcinoma Cells)
细胞别称:HCC44细胞系;结直肠癌肝转移细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
临床背景:成年男性患者原发灶为乙状结肠中分化腺癌,伴肝转移
组织来源:手术切除的结直肠腺癌肝转移组织
生长特性:贴壁生长(可形成多层堆积)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高,胞质嗜碱性
细胞代数:P5 - P15(保持肿瘤细胞异质性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1.2mL冻存管
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
培养条件:5% CO₂恒温培养箱,37℃恒温环境
冻存条件:含10% DMSO的完全冻存液,液氮气相长期保存
增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(受血清浓度影响)
应用限制:肿瘤机制研究专用,禁止体内移植实验
二、细胞培养操作指南
初始处理:
冻存管复苏:37℃水浴轻摇解冻,离心去除冻存液后重悬接种
培养瓶运输:酒精消毒后立即移入培养箱静置8小时
传代时机:融合度达90% - 95%时进行(建议每周传代2次)
传代密度:按1:3至1:6比例接种(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)
消化程序:
使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘回缩后终止
关键要点:
维持培养基pH值稳定(7.2 - 7.4)
定期检测支原体(建议每3代检测)
传代后6小时完成首次换液
三、细胞冻存操作规范
冻存准备:
对数生长期细胞(融合度80% - 90%)
冻存液配方:70%完全培养基+20% FBS+10% DMSO
冻存浓度:5×10⁶至1×10⁷ cells/mL
程序控制:
梯度降温:室温→4℃(30min)→-80℃(24h)→液氮储存
质量检测:
复苏存活率≥85%(台盼蓝法)
功能验证:CCK - 8检测P8代细胞增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
质量保障:
1. 到货72小时内提供复苏指导及问题反馈通道
2. 配套提供STR鉴定报告(18个位点)
3. 每批次附细胞培养历史记录表
重发条款:
1. 干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货污染证明(提供48小时内无菌检测报告)
3. STR匹配率<95%
免责声明:
1. 客户自行修饰细胞基因组导致特性改变
2. 使用非推荐培养基超过3代
3. 未按规范进行定期支原体检测
4. 液氮保存设备故障导致细胞失活