一、细胞基本属性
- 细胞名称：Jiyoye细胞（Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：HPMEC；肺微血管内皮细胞；肺动脉内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）
- 组织来源：肺组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需在37℃水浴中快速解冻，加入4mL预热的培养基轻柔混匀后离心接种；培养瓶收货后需用75%酒精擦拭表面，静置于培养箱中平衡2小时再观察状态。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%时进行传代（通常每3 - 4天一次）。
- 传代比例：推荐按1:2至1:3比例接种，建议初始密度为5×10³ cells/cm²。
- 消化方法：使用0.05% Trypsin - EDTA（不含Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞收缩变圆后立即加入含血清培养基终止消化。
- 注意事项：避免过度消化以保护细胞间连接蛋白，传代后24小时内需更换新鲜培养基以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：推荐冻存浓度为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，采用梯度降温法：4℃静置30分钟，转至 - 20℃保存2小时，再移至 - 80℃过夜，最终转入液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏后24小时内需通过台盼蓝染色检测存活率（≥95%为合格），并采用Transwell实验验证P5代细胞的基础屏障功能是否达标。
四、售后服务承诺
- 重发标准：包括运输过程中温度失控（需提供干冰状态证明）、3天内证实支原体或细菌污染（需PCR报告）、细胞复苏活力低于90%（台盼蓝检测），或STR鉴定与描述不符。
- 不予重发情形：涵盖客户延迟复苏超过72小时、使用非推荐培养基导致异常、反复冻融操作损伤细胞，以及未按规范进行支原体检测即开展实验的情况。
注：以上操作均需在生物安全二级（BSL - 2）实验环境下进行，具体技术问题可联系技术支持团队。
