一、细胞基本属性
本细胞系为人源肺微血管内皮细胞,别称包括HPMEC、肺微血管内皮细胞、肺动脉内皮细胞,来源于健康成人供体的肺组织微血管段。供体经过严格筛选,排除肺部疾病史且不限性别。该细胞为贴壁生长型,需依赖细胞外基质成分,呈现典型"鹅卵石样"单层形态,接触抑制后转为多角形结构。推荐使用P3 - P8代细胞进行实验,以保障功能稳定性和遗传一致性。细胞培养采用Endothelial Cell Medium培养基,含2%胎牛血清及专用内皮细胞生长因子添加剂,标准培养条件为37℃恒温、5% CO₂浓度及95%湿度环境。细胞规格提供T25培养瓶(含1×10^5活细胞)或1mL冻存管(含无血清保护液),冻存保存需维持 - 150℃以下低温。该细胞群体倍增时间约48 - 72小时,实际增殖速率受培养密度与基质条件影响。本产品仅限科研使用,禁止应用于临床诊断或动物实验。
二、细胞培养操作指南
新到细胞处理分两种形式:冻存管需在37℃水浴中快速解冻,加入4mL预热培养基混匀后接种;培养瓶需用75%酒精表面消毒,静置于培养箱平衡2小时后观察。传代操作建议在细胞融合度达85% - 90%时进行,通常间隔3 - 4天,推荐按1:2至1:3比例接种,最适密度为5×10³ cells/cm²。消化过程采用0.05%无钙镁Trypsin - EDTA溶液,37℃作用1 - 2分钟后立即终止,需在显微镜下确认细胞收缩变圆后快速中止反应。特别注意避免过度消化损伤细胞连接蛋白,传代后24小时需更换新鲜培养基以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
冻存液为无血清配方,含10% DMSO及专用渗透保护剂。冻存细胞密度应控制在1×10⁶至2×10⁶ cells/mL范围,操作流程包括离心收集细胞、冻存液重悬、梯度降温(4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜)及最终转移至液氮长期保存。质量验证包含双重检测:复苏后24小时通过台盼蓝染色确认存活率≥95%;P5代细胞需进行Transwell通透性实验验证基础屏障功能完整性。
四、售后服务承诺
符合以下情形可申请重发:1. 提供干冰包装异常照片证实的运输温度失控;2. 收货3日内经PCR检测确认的支原体/细菌污染;3. 台盼蓝法检测细胞活力低于90%;4. STR鉴定结果与声明不符。以下情况不承担重发责任:1. 收到细胞超过72小时未复苏;2. 使用非指定培养基导致细胞异常;3. 不当冻融操作造成的损伤;4. 未按规范进行支原体检测直接开展实验。(注:本产品执行ISO9001质量管理体系,所有批次均附细胞鉴定报告及质检证书)