一、细胞基本属性
1. 细胞名称:人黑色素瘤细胞(Human Melanoma Cells)
2. 细胞别称:M14;黑色素瘤细胞系
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 年龄性别:成年患者(临床来源,无性别限制)
5. 组织来源:皮肤黑色素瘤组织
6. 生长特性:贴壁生长(依赖完整细胞间连接)
7. 细胞形态:不规则多角形或梭形,可形成松散集落
8. 细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次以维持表型稳定性)
9. 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
10. 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS),液氮长期保存
13. 倍增时间:约24 - 36小时(受培养密度及血清批次影响)
14. 供应限制:仅限科学研究,禁止临床应用或商业转售
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时后再观察
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
3. 传代比例:1:3至1:6(依据实验需求调整接种密度)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项
- 消化终止时需添加含血清培养基中和
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:基础冻存液:70%培养基+20% FBS+10% DMSO
2. 细胞密度:推荐冻存浓度:5×10^6 cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化后离心去上清,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:体外侵袭实验(Matrigel模型)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内证实真菌/细菌污染(需提供染色图片)
- STR分型与数据库不匹配(需提供第三方检测报告)
2. 不予重发情形
- 未按说明书进行预适应培养直接冻存
- 使用非标准培养基导致细胞分化异常
- 超过建议代次(P15)引发的遗传漂移问题
- 未定期进行支原体检测造成的交叉污染
(注:本产品需配合专用培养试剂盒使用,操作规范详见随货说明书。)