MDCKII细胞

人细胞系

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XM-X14621×10^6 人细胞系8800


一、细胞基本属性

细胞名称:犬肾上皮细胞(Madin - Darby Canine Kidney Cells, Type II)

细胞别称:MDCKII;犬肾小管上皮细胞

种属来源:犬(Canis lupus familiaris)

组织来源:肾脏远曲小管上皮组织

生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:典型上皮样铺路石状单层,接触抑制后呈规则多边形

细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以确保屏障功能完整性)

细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:MEM基础培养基(含10% FBS + 1%非必需氨基酸+2mM L - 谷氨酰胺)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存

倍增时间:约18 - 24小时(受培养密度及传代方法影响)

供应限制:仅供体外研究使用,不可用于临床或体内实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

 - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基

 - 培养瓶:表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡2小时

传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)

传代比例:1:4至1:6(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)

消化方法:

 - 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液

 - 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止

注意事项:

 - 消化后需轻柔吹打避免细胞团块形成

 - 传代后12小时建议全量换液以去除死细胞


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 90%基础培养基)

细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 2×10^6 cells/mL

冻存步骤:

 - 离心收集细胞后重悬于预冷冻存液

 - 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→转移至液氮长期保存

复苏验证:

 - 复苏后48小时进行活力检测(台盼蓝拒染率≥90%)

 - 功能验证:跨膜电阻检测(TEER值应符合标准范围)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)

2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)

3. 细胞活率低于85%(按标准流程检测)

4. 物种鉴定结果与标识不符

不予重发情形:

1. 客户未按规范进行细胞复苏操作

2. 使用未经验证的培养基添加剂

3. 反复冻融导致细胞活性丧失

4. 未按要求进行定期支原体检测


(注:以上内容基于标准操作流程编制,具体实验条件需根据研究目的优化。)