一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肺腺癌细胞系(Human Lung Adenocarcinoma Cell Line)
- 细胞别称:H1573;NCI - H1573
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:肺腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需预包被基质或专用培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁,核质比高,多呈不规则多边形
- 细胞代数:建议使用P5 - P15代(确保基因组稳定性及表型一致性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-150℃以下)
- 倍增时间:约24 - 36小时(与培养基更新频率及密度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于培养箱平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示剂)。
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项:
- 消化后需完全中和胰酶,避免残留影响细胞贴壁。
- 首次传代后48小时内避免频繁观察,减少扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮储存。
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 到货7天内证实微生物污染(需提供污染检测证据)。
- 细胞复苏后贴壁率低于80%。
- STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行预包被或使用非推荐培养基。
- 细胞培养箱CO₂浓度或湿度长期不达标。
- 传代时机械刮取细胞导致物理损伤。
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染。