一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H1993人肺癌细胞
- 细胞别称：H1993；肺腺癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：转移性肺腺癌（原发部位：肺）
- 组织来源：胸腔积液分离建系
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，多角形或梭形，核质比高
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用前10代以保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含10% DMSO），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与血清批次相关）
- 供应限制：仅用于肿瘤机制研究，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻摇解冻，离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶：酒精消毒后直接置于CO₂培养箱
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落
- 注意事项：
- 基质包被需提前4小时完成（建议0.1mg/mL胶原）
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后缓慢滴加冻存液重悬
- 梯度降温：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后贴壁率需≥85%（24小时显微观察）
- 特性验证：EGFR表达检测（Western Blot确认）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实交叉污染（需STR比对报告）
- 原代污染（支原体检测阳性）
- 细胞复苏后贴壁率低于80%
- 不予重发情形：
- 使用无胶原包被培养器皿导致异常
- 自行更换培养基成分影响增殖
- 未按要求进行定期传代导致老化
- 实验操作污染未及时反馈
