一、细胞基本属性
- 细胞名称:NCI - H2052细胞
- 细胞别称:人肺类癌细胞、肺转移性类癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年女性(供体信息经伦理审查,隐私保护)
- 组织来源:肺转移性类癌组织(胸腔积液来源)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁呈铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数,保证增殖活性与基因稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:约36 - 48小时(与血清批次及接种密度相关)
- 供应限制:仅限科学研究,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预温培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 传代后需离心去除残余消化酶
- 培养基需每48小时全量更换以维持营养供给
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞,缓慢加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 转移至液氮气相层
- 复苏验证
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:NSE(神经元特异性烯醇化酶)分泌检测(P5代细胞应保持分泌活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测影像)
- STR位点与数据库不匹配(需提供第三方鉴定报告)
- 不予重发情形
- 未按规范使用胶原包埋培养导致贴壁失败
- 自行更换培养基成分引发细胞状态异常
- 冻存管脱离液氮储存超过5分钟
- 未定期检测支原体导致实验结果偏差