一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H2444细胞（人肺癌细胞系）
- 细胞别称：H2444；人肺腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：肺腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触及生长因子）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈多边形或铺路石样排列
- 细胞代数：P5 - P15（建议控制传代次数以维持遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含10% DMSO的完全培养基，-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（与培养密度及血清批次相关）
- 供应限制：科研用途，禁止临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置4小时再换液
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性）
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：完全培养基+10% DMSO
- 细胞密度：建议1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮保存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CCK - 8检测增殖曲线（P8代内需符合标准）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 7天内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 复苏存活率低于85%
- STR谱系比对不一致
- 不予重发情形
- 超时复苏（＞48小时）或反复冻融
- 使用非指定培养基或添加剂
- 未按手册操作导致污染或状态异常
- 未留存STR原始数据影响责任判定
