一、细胞基本属性
细胞名称:人非小细胞肺癌细胞NCI - H720
细胞别称:H720;NCI - H720;肺神经内分泌癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:肺转移灶(神经内分泌癌组织)
生长特性:贴壁生长(部分亚系可呈现悬浮聚团)
细胞形态:多形性上皮样,高核质比,常见伪足延伸
细胞代数:P4 - P10(建议使用前5代确保表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:胎牛血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(受血清批次影响)
应用限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于体内实验或药物筛选
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后离心去除冻存液,重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时再换液以降低运输应激
传代标准:融合度达80% - 90%(密度过高易触发分化)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
终止消化时需加入含血清培养基中和
传代后48小时内避免频繁观察,减少物理扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%完全培养基+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
对数生长期细胞经离心后重悬于冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→冻存盒 - 80℃过夜→转移至液氮
质检标准:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
特性验证:免疫荧光检测神经内分泌标志物(如CD56、Synaptophysin)
四、售后服务承诺
重发条件:
到货72小时内提供细胞污染证明(细菌/真菌PCR报告)
STR分型与数据库记录不符(需提供第三方检测报告)
免责条款:
客户未使用指定培养基导致细胞分化
传代超过推荐代数引发的基因漂移
液氮储存设备故障导致的冻存管破裂