一、细胞基本属性
- 细胞名称:NUGC - 4细胞(人胃癌细胞系)
- 细胞别称:NUGC4;胃癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年男性(原代供体年龄62岁,无胃部疾病史)
- 组织来源:胃腺癌组织(原代取自淋巴结转移灶)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,贴壁后呈不规则多边形,融合时呈铺路石状排列
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用中低代次以保证表型稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮(-196℃)长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖传代密度与培养基批次)
- 供应限制:研究级产品,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴60秒内解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,直接置于CO₂培养箱静置6小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(高密度可能诱发自发分化)
- 传代比例:1:3至1:6(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜表面蛋白完整性)
- 传代后48小时内避免频繁观察以防扰动贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:血清型冻存液(含90%培养基+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后去上清,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P10代内需保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输中温度记录异常(需提供温度监测曲线)
- 到货72小时内PCR检测出支原体污染
- 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色检测视频)
- STR位点与数据库不匹配(需第三方检测报告)
- 不予重发情形:
- 使用无血清培养基导致细胞脱落
- 未按规范进行胶原包直接接种
- 培养环境CO₂浓度超过8%
- 未执行每3代次的支原体例行检测