一、细胞基本属性
- 细胞名称：PE/CA - PJ41(cloneD2)细胞。
- 细胞别称：HPMEC；肺微血管内皮细胞；肺动脉内皮细胞。
- 种属来源：人（Homo sapiens）。
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）。
- 组织来源：肺组织微血管段。
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）。
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形。
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）。
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）。
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂）。
- 培养条件：气相为5% CO₂与95%空气，温度37℃，湿度95%。
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存。
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）。
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管收货后需立即进行37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀后离心去除冻存液。培养瓶收货后需用75%酒精擦拭表面，静置于培养箱2小时以平衡温度与气体环境。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%时需传代（通常每3 - 4天操作一次）。
- 传代比例：建议按1:2至1:3比例接种（推荐初始密度为5×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）于37℃消化1 - 2分钟，显微镜下观察到细胞收缩变圆后立即加入含血清培养基终止消化。
- 注意事项：避免过度消化以保护细胞间连接蛋白，传代后24小时内需更换新鲜培养基以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度建议为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，采用梯度降温流程（4℃放置30分钟，转至 - 20℃静置2小时，随后移至 - 80℃过夜，最终转移至液氮长期储存）。
- 复苏验证：复苏后24小时内需通过台盼蓝染色检测细胞存活率（≥95%为合格），并通过Transwell通透性实验验证P5代细胞的基础屏障功能。
四、售后服务承诺
- 重发标准：符合以下情形可申请重发：运输过程中温度失控导致细胞死亡（需提供干冰状态照片）；3天内证实支原体或细菌污染（需提交PCR检测报告）；细胞复苏活力低于90%（台盼蓝染色法）；STR鉴定结果与宣传信息不符。
- 不予重发情形：客户延迟复苏超过72小时；使用非推荐培养基导致细胞状态异常；反复冻融操作造成细胞损伤；未按规范进行支原体检测直接开展实验。
