一、细胞基本属性
细胞名称:人结肠腺癌细胞(Human Colon Adenocarcinoma Cells)
细胞别称:SKCO1;结肠癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(原代取自结肠腺癌组织)
组织来源:结肠腺癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞间连接)
细胞形态:上皮样多角形,单层紧密排列
细胞代数:P5 - P10(推荐使用代数以保证基因稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与传代密度相关)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究,禁止临床治疗或转基因操作
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,重悬接种
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置4小时后换液
传代标准:融合度达90% - 95%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项:
- 维持高血清浓度防止分化
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%完全培养基+10% DMSO
细胞密度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
- 4℃预冷15分钟后分装冻存管
- 程序降温:4℃ 1h → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝法)
- 增殖能力检测:接种后72小时应达对数生长期
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 液氮运输罐失压导致细胞活性丧失
2. 到货7日内证实交叉污染(需STR报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(提供接种后24小时影像)
不予重发情形:
1. 未使用指定培养基导致形态异常
2. 消化时机械吹打过度造成膜损伤
3. 长期传代超过P15导致基因漂移
4. 未定期进行微生物污染检测