一、细胞基本属性
- 细胞名称：SNU - C1细胞
- 细胞别称：HPMEC；肺微血管内皮细胞；肺动脉内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）
- 组织来源：肺组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，加入4mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，置于37℃培养箱静置2小时以平衡环境。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：推荐1:2至1:3分瓶（接种密度建议为5×10³ cells/cm²）。
- 消化方法
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，显微镜下观察细胞收缩变圆后立即终止反应。
- 注意事项
- 避免过度消化以防损伤细胞间连接蛋白。
- 传代后24小时内更换培养基，以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度需达1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后，轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后24小时内通过台盼蓝染色检测细胞存活率（标准≥95%）。
- 功能验证：Transwell实验检测P5代细胞的屏障通透性（需维持基础屏障功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰包装状态证明）。
- 3日内经PCR检测证实支原体或细菌污染。
- 细胞复苏后活力低于90%（台盼蓝染色法）。
- STR鉴定结果与宣传信息不符。
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过72小时。
- 使用非指定培养基导致细胞状态异常。
- 因反复冻融操作造成细胞损伤。
- 未按规范进行支原体检测直接开展实验。
