一、细胞基本属性
- 细胞名称:SU - DHL - 10细胞(人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系)
- 细胞别称:DLBCL细胞、B细胞淋巴瘤细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 背景特征:来源于弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者淋巴结组织,携带t(3;14)(q27;q32)染色体易位
- 组织来源:淋巴瘤组织
- 生长特性:悬浮聚集生长(部分贴壁依赖性,建议定期轻柔吹打维持单细胞状态)
- 细胞形态:圆形或类圆形,透光度高,边缘清晰
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用中低代次以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含10% DMSO冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%丙酮酸钠+2mM L -谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:程序降温冻存液(含胎牛血清及DMSO),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(需维持密度<1×10⁶ cells/mL)
- 应用限制:仅限肿瘤机制研究与药物筛选,不可用于临床治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后直接转移至15mL离心管,加5mL预热培养基离心去上清
- 培养瓶:观察运输沉降情况,轻柔混匀后分装至新培养瓶
- 传代标准:密度达到8×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL或培养基明显酸化(每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:5(建议初始接种密度2×10⁵ cells/mL)
- 操作方法
- 离心收集细胞:(150×g,5分钟)
- 重悬时避免剧烈吹打:(防止细胞膜损伤)
- 注意事项
- 维持细胞密度低于1.2×10⁶ cells/mL:(预防自发分化)
- 换液时保留1/3原培养基:(适应代谢环境过渡)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 对数生长期收集细胞:离心后重悬于预冷冻存液
- 分装至冻存管后立即转入程序降温盒(-1℃/分钟)
- 梯度保存:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期存储
- 复苏验证
- 存活率≥85%:(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CD19/CD20流式检测(阳性率应>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 到货干冰完全挥发且细胞存活率<80%
- 72小时内经PCR证实支原体污染
- STR分型与ATCC数据库不匹配
- 免责情形
- 细胞培养超过推荐代次(P15)后发生变异
- 使用含β -巯基乙醇的培养基导致异常分化
- 未按标准进行周期性支原体检测
- 液氮保存中断超过24小时
(注:以上内容基于常规淋巴瘤细胞系信息整合,实际参数需以具体实验数据为准)