一、细胞基本属性
TRAMP - C1细胞源自转基因小鼠前列腺癌组织,属于上皮样贴壁生长细胞系,具有明确的肿瘤细胞特性。别称为小鼠前列腺癌细胞,种属来源为C57BL/6小鼠,供体年龄为成年雄性,组织取材于自发形成的原发前列腺肿瘤。细胞形态呈不规则多角形,贴壁后形成单层或轻度重叠,常规传代代数建议为P15 - P25代以维持基因组稳定性。细胞规格提供1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液),基础培养基选用RPMI - 1640(含10% FBS及1%双抗),培养条件需保持5% CO₂、37℃恒温及95%湿度环境。冻存采用含10% DMSO的无血清冻存液,长期保存需置于液氮气相(-150℃以下)。细胞倍增时间约为36 - 48小时,仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验。
二、细胞培养操作指南
细胞收货后需根据运输形式处理:冻存管建议37℃水浴快速解冻后转移至含5mL预热培养基的离心管,离心去除冻存液后重悬接种;培养瓶经酒精表面消毒后直接置于培养箱平衡2小时。传代标准为融合度达80% - 90%,推荐传代比例1:3至1:4,接种密度不低于3×10⁴ cells/cm²。消化过程使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃孵育2 - 3分钟,显微镜下确认细胞间隙扩大后立即加入含血清培养基终止消化。需注意避免消化过度导致细胞膜损伤,传代后首次换液应在接种后48小时内完成,以清除残留死细胞。
三、细胞冻存操作规范
冻存液采用基础培养基配制的无血清冻存体系(含10% DMSO及10% FBS),冻存密度需达5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。操作步骤包括离心收集对数生长期细胞,轻柔重悬于冻存液后分装至冻存管,实施梯度降温程序:4℃预冷30分钟,-20℃维持2小时,-80℃过夜后转入液氮长期保存。复苏后需进行活力验证,要求台盼蓝染色检测存活率≥90%,同时建议通过软琼脂克隆形成实验验证肿瘤细胞特性,确保P15代细胞仍保持致瘤性。
四、售后服务承诺
符合以下条件可申请重发:运输过程干冰耗尽导致细胞活性丧失(需提供包装状态影像证明),到货72小时内经qPCR证实支原体污染,或STR鉴定结果与数据库不匹配。以下情况不承担重发责任:客户未按规范进行复苏(如解冻后静置超过30分钟),使用非指定培养基导致细胞分化或死亡,反复冻融操作引起的活力下降,或未在传代前进行常规无菌检测造成的污染扩散。技术支持范围包括培养条件优化咨询及功能实验方案指导,自收货日起提供30天细胞状态跟踪服务。