一、细胞基本属性
- 细胞名称:U251胶质瘤细胞
- 细胞别称:U - 251 MG;人胶质母细胞瘤细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:脑组织(胶质母细胞瘤来源)
- 生长特性:贴壁生长(依赖培养基营养成分)
- 细胞形态:不规则多角形或梭形,具典型肿瘤细胞侵袭性特征
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(受培养密度与血清批次影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁观察细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞膜损伤)
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P8代细胞应保持活跃增殖能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货7天内经检测存在支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞STR谱系与数据库记录不符
- 不予重发情形:
- 客户解冻后超72小时未反馈问题
- 使用非标准培养基导致细胞形态异常
- 未按规范进行传代引发细胞老化
- 实验操作污染未及时处理影响细胞状态