木质素过氧化物酶(Lip)试剂盒

苯丙烷代谢途径


货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-BBW00948样紫外法745
XM-W-BBW00996样微板法1474







一、产品简介

木质素过氧化物酶(Lignin Peroxidase,简称Lip,EC1.11.1.14)是一种由微生物如白腐菌等产生的含亚铁血红素的糖蛋白。作为木质素生物降解过程中的主要木质素降解酶类,Lip在木质素降解、环境污染治理、生物制浆等领域具有广泛的应用前景。本试剂盒提供了一种灵敏、快速、简便的方法,用于检测生物样品中Lip的活性。

二、产品特点

  1. 高灵敏度:通过优化反应体系和检测条件,能够灵敏地反映Lip的活性变化。

  2. 操作简便:试剂盒内附有详细的操作说明书,步骤清晰,易于上手,无需复杂的前处理过程。

  3. 广泛适用性:适用于多种生物样品,如土壤、植物组织、微生物培养物等。

  4. 稳定可靠:试剂盒中的试剂经过严格筛选和测试,确保实验结果的稳定性和可靠性。

三、测定原理

Lip能够催化藜芦醇发生氧化反应,生成藜芦醛。藜芦醛在310nm波长处有特征吸收峰,通过测定该波长下的吸光度变化,可以间接测定Lip的活性。

四、试剂盒组成

  1. 试剂一:粉剂,用于提取样品中的Lip酶,4℃保存。临用前加入适量蒸馏水充分溶解。

  2. 试剂二:液体,用于催化反应,4℃避光保存。

  3. 试剂三:液体,用于终止反应和显色,4℃保存。

  4. 其他辅助试剂:如标准品、洗涤液等,根据具体实验需求提供。

五、所需仪器与用品

  1. 紫外分光光度计/酶标仪:用于测定310nm波长下的吸光度。

  2. 台式离心机:用于分离样品中的固体和液体成分。

  3. 可调式移液器:用于精确移取样品溶液和试剂。

  4. 微量石英比色皿/96孔UV板:用于盛放反应液,进行吸光度测定。

  5. 其他常用实验用品:如天平、研钵、低温离心机、震荡仪等。

六、实验步骤

  1. 样本处理:将新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过筛后称取适量样本,加入提取液进行提取。

  2. 测定步骤

    • 预热紫外分光光度计/酶标仪至310nm波长,蒸馏水调零。

    • 在EP管中依次加入试剂和样本,充分混匀。

    • 于适宜温度(如30℃)震荡反应一定时间(如15min)。

    • 加入终止液终止反应,离心后取上清液至比色皿/UV板中测定吸光值。

  3. 结果计算:根据吸光值的变化和标准曲线计算Lip的活性。

七、注意事项

  1. 样品处理:样品应新鲜采集,避免长时间暴露于空气中导致酶活性丧失。采集后应尽快进行提取和测定。

  2. 试剂保存:试剂盒中的试剂应严格按照说明书要求保存,避免受潮、变质。使用前应检查试剂的有效期和保存条件。

  3. 操作规范:实验过程中应严格遵守操作规程,确保实验结果的准确性。特别是要注意反应时间、温度等条件的控制。

  4. 安全防护:实验过程中应佩戴好个人防护装备,如手套、口罩等,避免试剂对人体造成伤害。

XM-W-BBW009木质素过氧化物酶(Lip)说明书-微板法96样.docx

XM-F-BBW009 木质素过氧化物酶(Lip)说明书-分光法48样.docx