一、细胞基本属性
细胞名称
中国仓鼠肺细胞(Chinese Hamster Lung Cells,CHL)
细胞别称
CHL细胞;仓鼠肺成纤维细胞
种属来源
中国仓鼠(Cricetulus griseus)
组织来源
肺组织
生长特性
贴壁生长(需经胰酶消化传代)
细胞形态
长梭形成纤维样,单层贴壁排列
细胞代数
P5 - P15(建议使用低代数以维持遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM/F12培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约24 - 36小时(依赖培养密度与传代处理)
供应限制
仅限科学研究,不可用于临床或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,室温消化2 - 3分钟,离心终止
注意事项
避免消化过度导致细胞团块;传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含8% DMSO及20% FBS)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞,重悬于冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证
复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法);传代后需检测细胞贴壁率及增殖曲线
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色检测结果)
不予重发情形
1. 未按规范进行传代导致细胞老化
2. 使用非指定培养基或血清
3. 液氮保存设备故障导致的反复冻融
4. 未在传代前进行支原体预防处理