一、细胞基本属性
- 细胞名称：MDBK牛肾细胞（Madin - Darby Bovine Kidney Cells）
- 细胞别称：MDBK细胞；牛肾上皮细胞
- 种属来源：牛（Bos taurus）
- 年龄性别：健康牛只（性别不限，供体筛选无肾脏疾病史）
- 组织来源：牛肾组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触抑制）
- 细胞形态：典型上皮样，单层排列呈“铺路石”状
- 细胞代数：P3 - P10（确保遗传稳定性和功能一致性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：MEM培养基（含10% FBS + 1%非必需氨基酸 + 1% L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度及传代比例）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心，弃上清后重悬接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱平衡2小时后观察贴壁情况
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性）
- 传代后12小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）
- 功能验证：细胞贴壁率及增殖曲线检测（P5代细胞应保持正常生长速率）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控证明）
- 收货3日内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- 种属鉴定与描述不符（需提供STR检测报告）
- 不予重发情形：
- 客户未在48小时内完成复苏操作
- 使用非指定培养基或血清导致细胞状态异常
- 多次冻融或不当操作引起的细胞损伤
- 未按规范进行细胞质检直接用于实验
