一、细胞基本属性
1. 细胞名称：牛骨骼肌细胞（Bovine Skeletal Muscle Cells）
2. 细胞别称：BSMC；骨骼肌成肌细胞；牛肌原细胞
3. 种属来源：牛（Bos taurus）
4. 年龄性别：健康成年牛（性别不限，供体筛选无肌肉病变史）
5. 组织来源：骨骼肌组织（股四头肌或背最长肌部位）
6. 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态：长梭形或纺锤形，融合后可形成多核肌管结构
8. 细胞代数：P3 - P10（确保肌源性分化潜能与增殖活性）
9. 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1.5mL冻存管（含专用冻存液）
10. 培养基：Skeletal Muscle Cell Medium（含15% FBS+成肌细胞生长因子补充剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清肌细胞冻存液（含5% DMSO及海藻糖保护剂），-150℃液氮长期保存
13. 倍增时间：约36 - 48小时（增殖期细胞密度需维持在2×10³ - 1×10⁴ cells/cm²）
14. 供应限制：仅供基础研究使用，不可用于疫苗生产或转基因研究
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理：
- 冻存管需37℃水浴快速解冻后，加入5mL预热培养基低速离心去冻存液。
- 培养瓶经紫外线照射外包装后，静置培养箱1小时再镜检观察。
2. 传代标准：细胞密度达70% - 80%融合时进行传代（避免完全融合导致自发分化）。
3. 传代比例：1:3至1:4（推荐使用0.1%明胶预包被培养皿）。
4. 消化方法：
- 采用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液（含1mM EDTA）。
- 37℃消化3 - 5分钟，通过轻柔拍打促进细胞脱离。
5. 注意事项：
- 消化终止需使用含血清培养基完全中和。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿（促进细胞贴壁伸展）。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：专用无血清冻存液（含7.5% DMSO+5%蔗糖）。
2. 细胞密度：最佳冻存浓度1×10⁶ cells/mL（处于对数生长期细胞）。
3. 冻存步骤：
- 细胞悬液与冻存液按1:1体积比混合。
- 程序降温：4℃平衡30分钟后转入程序冷冻盒（ - 1℃/min降温至 - 80℃）。
4. 复苏验证：
- 复苏后72小时进行肌球蛋白重链免疫荧光鉴定。
- 分化能力检测：低血清诱导培养7天后应呈现肌管融合现象。
四、售后服务承诺
1. 重发标准：
- 到货干冰完全挥发且细胞瓶破裂（需提供开箱视频记录）。
- 7日内经qPCR证实支原体污染（需提供电泳检测图谱）。
- 细胞接种3天后贴壁率低于70%（需提交相差显微镜图像）。
- STR分型与物种信息不符。
2. 不予重发情形：
- 未按规范进行胶原包被导致贴壁失败。
- 擅自使用胎牛血清替代指定培养基。
- 超过建议代数（P10）后出现的分化能力下降。
- 未执行推荐消化程序造成的细胞集团损伤
