一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸡输卵管上皮细胞（Chicken Oviduct Epithelial Cells）
- 细胞别称：COEC；输卵管上皮细胞；禽类生殖道上皮细胞
- 种属来源：鸡（Gallus gallus）
- 年龄性别：健康成年母鸡（供体筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：输卵管黏膜上皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈多边形或扁平鳞状
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Epithelial Cell Medium（含5% FBS+上皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：39℃（适配禽类生理温度）；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度与基质包被条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于禽类疫苗生产或临床治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：39℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱2小时适应温度
- 传代标准：细胞融合度达80%-90%（建议每2-3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶-EDTA（含低浓度Ca²⁺）
- 39℃消化3-5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免机械刮取（保护细胞间紧密连接结构）
- 传代后12小时内更换培养基以清除残余消化酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：免疫荧光染色检测角蛋白表达（P5代细胞应维持上皮特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
- 5天内确认支原体或真菌污染（需提供荧光定量PCR结果）
- 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法复检）
- 物种鉴定结果与描述不符（需提供STR比对报告）
- 不予重发情形
- 客户未按规范预热培养基直接使用
- 自行更换非推荐胶原包被培养器皿
- 多次冻融导致细胞膜完整性受损
- 未在生物安全柜操作引发交叉污染
（注：以上内容均基于标准操作流程，实际应用需结合实验室具体条件优化。）
