一、细胞基本属性
- 细胞名称:牛骨骼肌微血管内皮细胞(Bovine Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:BSMMEC;骨骼肌微血管内皮细胞;肌组织内皮细胞
- 种属来源:牛(Bos taurus)
- 年龄性别:健康成年牛(性别不限,供体筛选无骨骼肌病变史)
- 组织来源:骨骼肌组织微血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:单层铺路石状排列,接触抑制后呈规则多边形
- 细胞代数:P3 - P8(维持功能稳定性与低传代变异风险)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS+血管内皮生长因子及肝素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受细胞密度及基质包被影响)
- 供应限制:仅限科研使用,不可用于临床、诊断或畜牧生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每3 - 5天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA),37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项:避免消化过度(防止细胞膜损伤);传代后12小时内更换培养基以清除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、40%基础培养基及50%胎牛血清)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%);功能验证:CD31免疫荧光染色及跨膜电阻值检测(P5代细胞屏障功能完整)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);
- 到货3日内经PCR证实支原体/细菌污染;
- 复苏后细胞存活率低于90%(需提供台盼蓝染色图像);
- 细胞种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形:
- 收货后超72小时未复苏;
- 使用非指定培养基或未进行基质包被;
- 未按规范传代导致细胞老化或污染;
- 实验操作不当致细胞功能异常。
(本产品经STR鉴定及血管性血友病因子(vWF)阳性标记验证,提供完整质检报告。)