一、细胞基本属性
细胞名称
B16小鼠黑色素瘤细胞（B16 Mouse Melanoma Cells）
细胞别称
B16细胞；小鼠黑色素瘤细胞；C57BL/6黑色素瘤细胞
种属来源
小鼠（Mus musculus）
品系背景
C57BL/6小鼠来源（自发黑色素瘤模型）
组织来源
皮肤黑色素瘤组织
生长特性
贴壁生长（需适当细胞外基质支持）
细胞形态
不规则梭形或多角形，聚集生长时呈深色颗粒状
细胞代数
P5 - P15（推荐使用代数，保证致瘤性稳定）
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
培养基
高糖DMEM培养基（含10% FBS + 1%双抗）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
含10% DMSO的胎牛血清冻存液， - 150℃以下长期保存
倍增时间
约24 - 36小时（与培养基血清浓度相关）
应用领域
肿瘤侵袭转移研究、药物敏感性测试、免疫治疗模型构建
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或活体治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻后离心去冻存液，重悬接种
培养瓶：酒精擦拭外壁后直接置于CO₂培养箱
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（避免过度密集导致自发分化）
传代比例
1:3至1:6（根据实验需求调整接种密度）
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落
关键提示
消化终止时需添加含血清培养基中和
首次传代建议保留原代培养基混合过渡
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
90%完全培养基 + 10% DMSO
细胞密度
冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
离心收集对数生长期细胞，重悬分装至冻存管
程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期储存
质量控制
复苏存活率 ≥85%（台盼蓝染色法验证）
功能检测：体外成瘤实验（P10代内需保持致瘤性）
四、售后服务承诺
重发标准
1.干冰运输失效导致细胞团块融化（需提供温度记录）
2.到货48小时内证实细菌/真菌污染（需提供显微图像）
3.细胞复苏存活率低于80%（规范操作前提下）
4.STR分型与小鼠背景不符
免责条款
1.客户未按推荐条件培养导致表型改变
2.反复传代超过P20代致遗传漂移
3.未进行定期支原体检测引发交叉污染
4.冻存管非标准方式解冻造成冰晶损伤
