一、细胞基本属性
- 细胞名称:TCMK - 1小鼠肾小管上皮细胞
- 细胞别称:TCMK - 1细胞;小鼠肾小管上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾小管上皮组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
- 细胞形态:典型多角形或铺路石样单层,接触抑制后呈紧密排列
- 细胞代数:P3 - P10(保证功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10%FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%Trypsin - EDTA(含0.02%EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项
- 避免消化过度(损伤细胞极性蛋白结构)
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO及血清替代保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃30min → - 20℃2h → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应维持肾小管上皮特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 2. 5天内证实微生物污染(需提供电镜或PCR检测结果)
- 3. 细胞贴壁率低于80%(显微形态学评估)
- 4. 物种鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 1. 客户收货后超过48小时未启动复苏程序
- 2. 自行更改培养基配方导致细胞分化
- 3. 未按推荐传代密度操作引发衰老
- 4. 未进行基础功能验证即开展基因编辑实验