一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠心肌细胞(Rat Cardiac Myocytes)
细胞别称:Rat CM;心肌细胞;心脏原代细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:新生乳鼠或成年健康大鼠(性别不限,供体无心脏疾病史)
组织来源:心脏组织(心室或心房分离)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:梭形或多角形,可见自发性节律收缩
细胞代数:原代细胞(P0 - P3,建议不超过P5以保持功能特性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:心肌细胞专用培养基(含5% FBS、L - 谷氨酰胺及心肌细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含12% DMSO及能量代谢保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:原代细胞增殖能力有限,功能维持期约7 - 10天
供应限制:仅用于体外研究,不可用于体内移植或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后更换新鲜培养基
传代标准:细胞融合度达70% - 80%(过度融合影响收缩功能)
传代比例:1:1至1:2(低传代比例维持细胞特性)
消化方法:
- 使用0.1%胶原酶II消化10 - 15分钟
- 37℃轻柔震荡至单细胞悬液,离心后终止消化
注意事项:
- 严格避免机械损伤(维持细胞间电偶联结构)
- 培养48小时后需添加新鲜培养基补充营养
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含12% DMSO及抗氧化剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→冻存管装入泡沫盒 - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:钙离子成像检测收缩同步性(P3代细胞需保持节律性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 细胞收缩功能丧失(需提供视频记录及检测数据)
4. 种属鉴定与描述不符(STR检测报告为证)
不予重发情形:
1. 使用非胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 培养超过推荐代数出现功能衰退
3. 未按规范进行培养基更换引发代谢异常
4. 擅自使用电刺激或药物干预导致数据异常