一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠视网膜神经节细胞(Rat Retinal Ganglion Cells)
细胞别称
RGCs;视网膜神经节细胞;视网膜神经元
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
组织来源
视网膜神经节细胞层
生长特性
贴壁生长(需经多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被处理)
细胞形态
典型神经元多极形态,可见轴突及树突结构
细胞代数
P3 - P8(确保电生理活性与神经特异性表达)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
神经细胞专用培养基(含2% B27添加剂+神经营养因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及神经保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~5 - 7天(依赖神经营养因子浓度及包被基质)
供应限制
仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:表面消毒后静置培养箱4小时平衡(避免震动干扰贴壁)
传代标准
细胞密度达80% - 90%融合(神经突触网络形成完整时操作)
传代比例
1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA(含神经保护剂)
37℃消化3 - 5分钟,终止后轻柔吹打保留轴突完整性
注意事项
消化后需立即加入含血清培养基终止反应
传代后48小时内避免换液以维持神经突触再生
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清神经专用冻存液(含10% DMSO+抗氧化剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证
复苏后48小时进行Calcein - AM/PI双染检测存活率(≥85%)
功能验证:免疫荧光检测Brn3a/Thy1阳性率(P5代≥90%)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监控数据)
2. 7日内证实支原体污染(需提供荧光PCR检测结果)
3. 神经特异性标记物表达低于承诺标准
4. 未通过轴突生长能力测试(微流控芯片验证)
不予重发情形
1. 未使用指定包被基质导致细胞贴壁失败
2. 擅自添加非推荐生长因子干扰细胞特性
3. 培养环境CO₂浓度或温度波动超过允许范围
4. 未按规范进行神经突触活性检测