一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠脐带间充质干细胞(Rat Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称
rUC - MSCs;脐带间充质干细胞;脐带干细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
新生大鼠(性别不限,供体筛选健康无遗传缺陷)
组织来源
脐带组织华通氏胶(Wharton’s Jelly)
生长特性
贴壁生长(依赖基质表面贴附)
细胞形态
长梭形或成纤维样,贴壁后呈漩涡状排列
细胞代数
P3 - P8(保持多向分化潜能与遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%双抗+10ng/mL bFGF生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(依赖传代密度与生长因子浓度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80%-90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液)
37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
消化过程轻柔吹打以避免机械损伤
传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶-2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
分装至冻存管后梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:成骨/成脂分化潜能检测(P5代细胞需维持分化能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供全程温控记录)
2. 7天内证实支原体或真菌污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏活力低于85%(台盼蓝染色法)
4. 物种鉴定与描述不符(需提供STR或PCR检测结果)
不予重发情形
1. 客户未按规范超时保存(冻存管解冻后超72小时未处理)
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常或死亡
3. 未使用推荐冻存液导致细胞复苏失败
4. 实验操作污染未及时反馈(超过质控期7天)