一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠颈动脉平滑肌细胞(Rat Carotid Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称:RASMC;颈动脉平滑肌细胞;血管平滑肌细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
组织来源:颈动脉中膜平滑肌层
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
细胞形态:典型长梭形或纺锤形,平行排列成束状结构
细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与表型一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+平滑肌细胞特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(与培养密度及血清浓度相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后,静置培养箱2小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
注意事项:
- 避免剧烈吹打(防止机械损伤)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及稳定剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光鉴定(P5代细胞应维持收缩蛋白表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 3天内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. 种属鉴定与描述不符
不予重发情形:
1. 收货后超72小时未复苏
2. 使用非指定培养基或血清浓度
3. 多次冻融导致细胞损伤
4. 未按规范进行污染排查即开展实验