一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠食管上皮细胞（Rat Esophageal Epithelial Cells）
- 细胞别称：REEpiC；食管上皮细胞；食管黏膜上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无食管疾病史）
- 组织来源：食管上皮组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质胶或胶原包被）
- 细胞形态：典型铺路石样单层，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与增殖活性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：上皮细胞专用培养基（含2% FBS+表皮生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖传代密度及培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基离心后重悬接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱平衡2小时后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下见细胞间隙增大后终止消化
- 注意事项：
- 避免消化过度（防止紧密连接蛋白降解）
- 传代后12 - 24小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格）
- 功能验证：细胞角蛋白免疫荧光染色（P5代细胞应维持上皮特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供PCR检测结果）
- 复苏后活率低于85%（需提供台盼蓝染色图像）
- 细胞STR鉴定与描述不符
- 不予重发情形：
- 客户未按规范保存（如延迟复苏超过48小时）
- 使用非推荐培养基导致细胞分化或死亡
- 自行反复冻融导致细胞损伤
- 未定期检测支原体直接用于共培养实验
