一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠胃黏膜上皮细胞
- 细胞别称:胃上皮细胞;胃黏膜细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体无胃肠道疾病史)
- 组织来源:胃黏膜组织经酶消化法分离
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石状排列,融合后呈现多边形紧密连接
- 细胞代数:P3 - P8代(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:胃上皮细胞专用培养基(含5% FBS+EGF及胃黏膜细胞生长添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养密度与培养基批次)
- 供应限制:仅限体外研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时适应
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含钙镁离子螯合剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项:
- 消化后需完全中和胰酶(残留酶会破坏细胞间紧密连接)
- 首次换液建议在贴壁后6 - 8小时进行,避免细胞脱落
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮气相层
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:黏蛋白分泌检测(P5代细胞应保持基础分泌活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
- 细胞存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形:
- 未按说明书要求进行胶原包被导致贴壁失败
- 使用非指定培养基培养超过48小时
- 未执行梯度降温直接冻存导致细胞损伤
- 实验操作污染未及时反馈(超过7天申诉期)
(注:本产品需在生物安全二级实验室操作,所有操作需符合实验动物伦理规范)