一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠腹膜间皮细胞(Rat Peritoneal Mesothelial Cells)
细胞别称:RPMC;腹膜间皮细胞;腹腔间皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,SPF级实验动物)
组织来源:腹膜间皮组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层扁平铺路石样,接触抑制后呈现不规则多边形
细胞代数:P3 - P6(维持间皮细胞特异性标志物表达)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:Mesothelial Cell Medium(含5% FBS+EGF/HGF生长因子)
培养条件:恒温37℃、5% CO₂、饱和湿度培养环境
冻存条件:程序降温专用冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),液氮气相长期保存
倍增时间:约36 - 60小时(与细胞传代次数相关)
供应限制:仅供基础研究使用,禁止临床应用或转基因操作
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴快速融化后,加入3mL预温培养基离心洗涤
- 培养瓶运输:酒精表面消毒后立即移入CO₂培养箱静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 85%时进行传代(约每2 - 3天一次)
传代比例:建议1:3分瓶(初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方案:
- 采用0.25%胰酶 - 0.53mM EDTA混合消化液
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察到细胞边缘回缩时终止反应
关键注意:
- 消化过程中轻柔拍打培养瓶辅助细胞脱落
- 首次换液应在接种后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存保护剂:无血清冻存液(含8% DMSO+海藻糖复合配方)
冻存密度:推荐1.2×10⁶ cells/mL悬浮浓度
程序化冻存:
- 4℃预冷30分钟→ - 80℃梯度降温盒过夜→液氮长期储存
质量控制:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法检测)
- 功能验证:细胞角蛋白18免疫荧光染色确认间皮特性
- 无菌检测:每批次进行细菌/真菌培养及支原体PCR检测
四、售后服务承诺
退换承诺:
1. 干冰运输损耗(需提供完整包装温度记录)
2. 到货72小时内发现微生物污染(附第三方检测报告)
3. STR鉴定结果与备案信息不符
4. 细胞活性低于承诺标准(提供染色检测证据)
免责情形:
1. 未按推荐条件进行细胞传代培养
2. 使用非配套培养基超过48小时
3. 细胞冻存后未及时转移至液氮
4. 实验人员操作污染导致细胞变质
注:本产品需配合专用包被培养皿(胶原蛋白Ⅳ型包被)使用,建议定期检测间皮细胞特异性标志物(WT - 1、Calretinin)表达水平以确认细胞特性。