一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠肠道干细胞（Rat Intestinal Stem Cells）
细胞别称：ISC；肠道上皮干细胞；隐窝基底柱状细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体经肠道病理学筛查）
组织来源：小肠隐窝基底部（Lgr5阳性细胞富集）
生长特性：贴壁依赖性生长（需基质胶包被培养器皿）
细胞形态：单层培养呈立方形，三维培养形成类器官结构
细胞代数：P2 - P6（维持干细胞特性与分化潜能）
细胞规格：5×10^4 cells/冻存管（含无血清冻存液）或预铺基质胶的24孔板
培养基：无血清肠道干细胞专用培养基（含EGF/Noggin/R - spondin1）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：程序降温冻存液（含10% DMSO及海藻糖），液氮气相长期保存
增殖周期：24 - 48小时（与Wnt信号激活强度正相关）
应用限制：仅用于基础研究，禁止临床治疗或转基因动物制备
二、细胞培养操作指南
复苏流程：冻存管37℃水浴振荡解冻，加入预冷培养基梯度稀释
传代时机：类器官直径达150 - 200μm或单层融合度70% - 80%
消化方案：使用预冷细胞解离试剂，4℃轻柔震荡5 - 8分钟
终止要领：加入含10% FBS的终止液，800rpm离心3分钟收集
关键提示：传代需保留10%原代培养基维持微环境稳态；基质胶需提前30分钟37℃液化后使用；首次换液需在接种后48小时进行
三、细胞冻存操作规范
冻存准备：消化后细胞悬液经台盼蓝染色确认活性＞95%
冻存密度：1.5×10^6 cells/mL（每支冻存管0.5mL体积）
梯度降温：程序降温仪以-1℃/min速率降至-80℃，24小时后转液氮
质控指标：复苏后类器官形成率≥60%（三维培养验证）；Lgr5免疫荧光阳性率＞90%（P3代检测）；碱性磷酸酶活性检测（维持干细胞未分化状态）
四、售后服务承诺
重发条件：1.干冰运输箱温度记录＞-150℃（需提供温度记录仪数据）；2.到货72小时内证实真菌污染（需第三方检测报告）；3.Lgr5流式检测阳性率＜85%（P3代基准值）；4.类器官形成能力缺失（需提供明场显微图像）
免责声明：1.客户自行更改培养基配方导致功能异常；2.未使用指定基质胶影响细胞贴壁；3.超低温保存设备故障导致反复冻融；4.接种密度低于1×10^4 cells/cm²引发分化
注：本产品需配合专用基质胶及细胞因子补充剂使用，实验前请仔细阅读随货技术手册
