一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠成骨细胞（Rat Osteoblasts）
- 细胞别称：OB细胞；成骨细胞；骨祖细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：新生或成年大鼠（性别不限，供体筛选无骨代谢疾病史）
- 组织来源：颅骨或长骨骨组织（经机械分离与酶消化法获取）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤连蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：初始呈长梭形，分化后呈现多角形或立体结节状结构
- 细胞代数：P3 - P8（确保成骨分化潜能与增殖活性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
- 培养基：成骨诱导培养基（含10% FBS+β - 甘油磷酸钠+抗坏血酸+地塞米松）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 96小时（依赖诱导因子浓度与细胞分化阶段）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后离心，重悬于预热培养基接种
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免频繁传代导致成骨分化能力下降
- 分化阶段需定期补充诱导剂以维持矿化功能
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清细胞冻存液（含10% DMSO+90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测或茜素红染色矿化结节形成实验
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）
- 复苏后细胞存活率低于85%（需提供染色检测图像）
- 细胞种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 未按规范进行预包被处理导致贴壁失败
- 使用非诱导培养基导致分化功能异常
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
- 实验操作污染未及时反馈（超过7天）
