一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠自然杀伤细胞（Rat Natural Killer Cells）
- 细胞别称：NK细胞；大鼠NK细胞；大鼠自然杀伤细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体经SPF级环境筛选）
- 组织来源：脾脏或外周血单核细胞分离
- 生长特性：悬浮生长（依赖细胞因子激活与扩增）
- 细胞形态：圆形或类圆形，单细胞或小簇悬浮，表面光滑
- 细胞代数：P2 - P5（保证细胞毒活性与表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：NK细胞专用培养基（含10% FBS+IL - 2及NK细胞激活因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖激活状态与细胞因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 悬浮培养瓶：直接转移至培养箱静置30分钟，轻柔混匀后观察细胞密度
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 cells/mL或活性下降时（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐起始密度5×10^5 cells/mL）
- 扩增方法：
- 离心收集细胞，重悬于新鲜含IL - 2的培养基
- 补加激活因子（如IL - 15或抗CD16抗体）以增强细胞毒性
- 注意事项：
- 避免长时间离心（≤300g，5分钟）以防细胞损伤
- 定期检测细胞活性与表型（CD161+/CD3 - 标志）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%）
- 功能验证：LDH释放法检测细胞毒性（效靶比10:1时杀伤率≥50%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 3天内证实支原体或细菌污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏后存活率低于90%（台盼蓝染色法）
- 流式细胞术检测表型与描述不符（CD161阳性率≥85%）
- 不予重发情形：
- 未按推荐流程激活或扩增细胞
- 使用非指定培养基或细胞因子导致功能异常
- 收货后超72小时未处理或冻存
- 未定期检测支原体或未规范操作导致污染
