一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠脊髓星形胶质细胞（Rat Spinal Cord Astrocytes）
- 细胞别称：脊髓星形胶质细胞；脊髓胶质细胞；RSCA
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，无神经系统疾病史）
- 组织来源：脊髓组织原代分离
- 生长特性：贴壁生长（依赖多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被）
- 细胞形态：原代培养早期呈星形或多突起，成熟后胞体增大且突起延长
- 细胞代数：P2 - P5（维持功能活性与纯度）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS+2% B27+1%双抗+10 ng/mL CNTF）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-196℃）
- 倍增时间：~72 - 96小时（原代细胞增殖较慢）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱4小时恢复代谢
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（原代细胞建议每5 - 7天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02% DNase I）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱壁
- 注意事项：
- 避免机械损伤（星形胶质细胞膜脆性较高）
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转移至液氮
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：GFAP免疫荧光染色（纯度≥95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中液氮罐泄露或温度异常（需提供物流凭证）
- 收货3天内检测出支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（经我方实验室复检确认）
- 细胞标志物（GFAP）表达阴性
- 不予重发情形：
- 解冻后未及时接种（超过6小时）
- 使用非推荐培养基或未添加生长因子
- 未按规范进行包被处理导致贴壁失败
- 未进行支原体检测直接用于共培养实验
