一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠嗅球神经干细胞（Rat Olfactory Bulb Neural Stem Cells）
- 细胞别称：OB - NSC；嗅球神经前体细胞；嗅球来源神经干细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：嗅球组织神经干细胞富集区
- 生长特性：悬浮成球生长（神经球形成能力）
- 细胞形态：初始培养呈单细胞悬浮态，增殖后形成典型神经球结构
- 细胞代数：P3 - P8（维持多向分化潜能与增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25超低吸附培养瓶或1mL冻存管（含神经干细胞专用冻存液）
- 培养基：神经干细胞无血清培养基（含20 ng/mL EGF + 20 ng/mL bFGF）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清程序冻存液（含DMSO及神经保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 增殖周期：~72 - 96小时（依赖神经球密度及生长因子浓度）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预温培养基
- 神经球：直接转移至超低吸附培养瓶，补充新鲜生长因子
- 传代标准：神经球直径达150 - 200 μm（通常每5 - 7天机械解离传代）
- 传代比例：1:2至1:3（机械吹打分散为单细胞悬液）
- 解离方法：
- 使用神经球专用解离试剂（含胶原酶/木瓜酶复合物）
- 37℃震荡解离5分钟，离心后重悬于新鲜培养基
- 注意事项：
- 避免反复酶消化（损伤干细胞表面标志物）
- 传代后48小时内补充双倍生长因子促进神经球形成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清神经干细胞冻存液（含7.5% DMSO及海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 收集神经球离心后重悬于冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟→控速降温仪（ - 1℃/min）至 - 80℃→液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后72小时检测神经球形成率（标准≥70%）
- 多能性验证：Nestin免疫荧光染色（P5代细胞阳性率需＞90%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 干冰运输链断裂导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 7日内经qPCR证实支原体污染
- 神经球形成率低于60%（需提供倒置显微镜图像）
- 特异性标志物（Sox2/Pax6）表达不符合标准
- 不予重发情形：
- 使用含血清培养基导致细胞自发分化
- 未按时补充生长因子引起的增殖停滞
- 机械解离力度过大造成单细胞存活率下降
- 未按规范进行无菌操作引发的交叉污染
