一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠结膜成纤维细胞（Rat Conjunctival Fibroblasts）
- 细胞别称：RCF；结膜成纤维细胞；结膜间质细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：结膜组织（经胶原酶消化分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质包被）
- 细胞形态：典型长梭形或星形，单层排列呈放射状
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（受培养密度与血清浓度影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱1小时适应
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻柔拍打促进细胞脱附
- 注意事项：
- 避免消化过度（损伤细胞膜表面受体）
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶-3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：细胞迁移实验（P5代细胞应维持活性胶原分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1.运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控数据）
- 2.5天内证实真菌/细菌污染（需提供污染检测报告）
- 3.细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- 4.种属鉴定与标识不符
- 不予重发情形：
- 1.收货后未及时处理导致细胞活性丧失
- 2.使用非配套培养基或血清引起功能异常
- 3.未按规范进行细胞传代导致提前衰老
- 4.实验操作污染未及时反馈
