一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠舌表皮细胞
- 细胞别称:舌上皮细胞;口腔表皮细胞;舌黏膜表皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
- 组织来源:舌表皮组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺展,接触抑制后呈多边形或铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(维持表皮细胞分化特性与屏障功能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:表皮细胞专用培养基(含2% FBS + 表皮生长因子及钙离子调节剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及低温保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约60 - 72小时(与细胞密度及培养基更新频率相关)
- 供应限制:仅限于科学研究,禁止用于临床或体内实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,加入3mL预热培养基轻柔混匀;培养瓶经酒精消毒后静置培养箱1小时再观察贴壁情况。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1.5 - 2分钟,显微镜下见细胞间隙扩大后立即终止反应。
- 注意事项:消化过程需严格控制时间,避免基底膜蛋白降解;传代后12小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度建议为1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管,按程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后12小时进行活率检测(台盼蓝染色存活率≥90%);功能验证包括角蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应保持典型表皮细胞标记物表达)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);2.到货48小时内经PCR证实支原体污染;3.复苏后活率低于承诺值(需提供染色检测视频);4.细胞种属鉴定与大鼠不符。
- 不予重发情形:1.收货后未及时处理导致细胞状态异常;2.擅自更换培养基或添加不明成分;3.未按规范进行预包被培养导致贴壁失败;4.实验操作污染导致细胞损毁。
(注:所有实验操作需遵守生物安全规范,细胞不可用于人体相关研究。)