一、细胞基本属性
- 细胞名称：人II型肺泡上皮细胞（Human Type II Alveolar Epithelial Cells）
- 细胞别称：AT2细胞；肺泡Ⅱ型细胞；肺表面活性物质分泌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体无呼吸系统疾病史）
- 组织来源：肺组织肺泡区（经胶原酶消化分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖特定细胞外基质包被）
- 细胞形态：单层铺展时呈立方形，胞质内含层状包涵体
- 细胞代数：P2 - P6（推荐使用代数，确保分泌功能稳定）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：专用上皮细胞培养基（含10% FBS + 表皮生长因子 + 激素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO + 海藻糖保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（与培养基批次及细胞密度相关）
- 供应限制：仅限科学研究，禁止用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管：37℃水浴解冻后，离心去除冻存液，加入预热培养基重悬
- 培养瓶：酒精擦拭外壁后直接置于CO₂培养箱静置4小时
传代标准
融合度达80% - 85%（避免过度融合影响分泌功能）
传代比例
1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
- 消化后需加入含血清培养基充分中和
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少机械扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 胎牛血清替代物）
细胞密度
冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心后缓慢逐滴加入冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
- 复苏后72小时检测Lamellar body形成（透射电镜验证）
- 功能检测：表面活性蛋白C（SP - C）免疫荧光染色
四、售后服务承诺
重发标准
1. 液氮运输罐真空失效导致细胞失活（需提供温度记录曲线）
2. 到货7日内经qPCR证实支原体污染
3. 细胞活性低于85%（Calcein - AM/PI双染法）
4. 标志物检测不符合AT2细胞特征（SP - B阳性率＜90%）
不予重发情形
1. 解冻后未按规程进行梯度离心直接接种
2. 擅自改用无基质包被的培养器皿
3. 超过推荐代数（P6）仍要求功能质控达标
4. 未进行周期性表面活性物质分泌检测
