一、细胞基本属性
- 细胞名称：人小胶质细胞（Human Microglia）
- 细胞别称：中枢神经系统驻留巨噬细胞；脑实质巨噬细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛查无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑实质组织（经磁珠分选或流式分选纯化）
- 生长特性：贴壁弱粘附型（需专用包被基质）
- 细胞形态：静息态呈分支状，活化后转变为阿米巴样
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P3代内保持功能活性）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25预包被培养瓶 或 1mL冻存管（含神经细胞专用冻存液）
- 培养基：Microglia Culture Medium（含1% FBS + 细胞因子组合）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清神经细胞冻存液（含低浓度DMSO及糖原保护剂），-150℃液氮储存
- 倍增时间：原代细胞不主动增殖（体外培养需细胞因子维持）
- 供应限制：仅限基础研究使用，不可用于药物筛选或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后转移至预包被培养瓶，补加3mL温培养基静置24小时
- 培养瓶：保留原培养基直接入培养箱，24小时后首次换液
- 传代标准：细胞密度达80%或出现活化迹象（形态变圆、伪足缩短）
- 传代比例：原代细胞建议1:1机械刮取法传代（避免酶消化损伤表面受体）
- 活化诱导：采用100ng/mL LPS或20ng/mL IFN - γ处理24小时可诱导促炎表型
- 注意事项：维持培养需添加CSF - 1因子（浓度10ng/mL），避免频繁震动导致自发活化
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：神经细胞专用无血清冻存液（含5% DMSO及海藻糖缓释体系）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL（高密度维持细胞间信号）
- 冻存步骤：离心后轻柔重悬于冻存液，程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 功能验证
- 吞噬功能检测：使用pHrodo标记淀粉样蛋白β42，活化后吞噬效率应提升3倍以上
- 纯度鉴定：CD11b+/CD45low流式检测≥95%，Iba1免疫荧光染色阳性
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 细胞复苏后48小时内CD11b表达率低于90%（需提供流式检测图）
2. 培养72小时未呈现静息态分支形态（需提供相差显微镜图像）
3. STR分型与数据库记录不符（需第三方检测报告）
- 不予重发情形
1. 未使用预包被培养瓶导致细胞贴壁失败
2. 擅自更改培养基成分引发细胞自发活化
3. 超过推荐代数（P3）后功能衰退
4. 未按规定进行定期支原体检测（每两周需提交检测记录）
