一、细胞基本属性
细胞名称
人脑皮层神经元细胞（Human Cerebral Cortex Neuronal Cells）
细胞别称
HBCN；皮层神经元；脑神经元细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
组织来源
脑皮层组织（经伦理审查及知情同意获取）
生长特性
贴壁生长（需多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养器皿）
细胞形态
典型多极形态，胞体呈锥形或星形，可见轴突及树突结构
细胞代数
原代培养（P0 - P3代，建议使用P0 - P2代以保证电生理活性）
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
神经基础培养基（含2% B27添加剂、谷氨酰胺及神经营养因子）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及神经保护剂），液氮长期保存（-150℃以下）
功能特性
具备动作电位产生能力，可形成功能性突触连接
供应限制
仅限体外科研使用，不可用于临床治疗、药物开发或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预温神经培养基离心洗涤（200g，5分钟）
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡后换液
传代标准
原代细胞不建议传代（若需扩增，建议使用P0 - P1代）
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含DNase I抑制剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞悬浮，立即终止反应
注意事项
- 避免机械损伤（神经元突起易断裂）
- 培养液中需持续补充神经营养因子（如BDNF、GDNF）
- 推荐使用低氧条件（3% O₂）以模拟脑内微环境
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清神经元专用冻存液（含10% DMSO、海藻糖及抗氧化剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（高密度冻存降低凋亡风险）
冻存步骤
- 离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
- 复苏存活率≥80%（台盼蓝染色检测）
- 功能验证：免疫荧光标记MAP2/NeuN，电生理膜片钳检测活性
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 7日内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测结果）
3. 细胞活性低于80%（附复苏后24小时检测报告）
4. 细胞身份鉴定不符（需STR或标志蛋白验证）
不予重发情形
1. 未使用专用培养基或包被基质
2. 解冻后未及时接种（超过2小时）
3. 擅自进行多次传代导致功能丧失
4. 未按规范进行电生理活性检测
