一、细胞基本属性
- 细胞名称：人气管上皮细胞（Human Tracheal Epithelial Cells）
- 细胞别称：HTEC；气管黏膜上皮细胞；呼吸道上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
- 组织来源：气管黏膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈多边形扁平状
- 细胞代数：P3 - P8（经功能性验证，确保黏液分泌及纤毛运动特性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：气液界面分化培养基（含2% Ultroser G + 上皮细胞特异性添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂），液氮气相长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖气液界面培养阶段及分化状态）
- 供应限制：仅限基础研究使用，不可用于药物开发或人体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预温培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于37℃培养箱，2小时后首次换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 85%（纤毛分化前需及时传代）
- 传代比例：1:2至1:3（建议预铺胶原基质提高贴壁效率）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，机械轻拍促进细胞脱落
- 注意事项：
- 分化阶段需转换为气液界面培养（维持黏液 - 纤毛清除功能）
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少CO₂浓度波动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含5% DMSO + 10%胎牛血清替代物）
- 细胞密度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL（分化前状态冻存）
- 冻存步骤：
- 消化后细胞经梯度降温程序：4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期存储
- 复苏验证：
- 复苏后72小时进行乙酰化微管蛋白免疫荧光检测（验证纤毛结构完整性）
- 功能性验证：黏液分泌量检测（ELISA法测定MUC5AC表达水平）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供冷链监控数据）
2. 到货7日内经qPCR证实支原体污染
3. 纤毛分化率低于30%（需提供免疫荧光检测结果）
4. 细胞STR位点与数据库不匹配
- 不予重发情形：
1. 未使用气液界面培养系统导致分化失败
2. 擅自添加细胞因子改变分化路径
3. 超过推荐代数（P8）后出现功能衰减
4. 未按要求预包被胶原基质影响细胞贴壁
